Western低背景封閉及抗體增敏稀釋液_western實驗應用試劑相關產品 - 上海培清科技有限公司

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產品分類

Western低背景封閉及抗體增敏稀釋液

所屬分類：western實驗應用試劑相關產品

產品型號：Western低背景封閉及抗體增敏稀釋液

在western實驗中，提高一抗和二抗的濃度，可有效的提高檢測的靈敏度，并降低抗體孵育時間。而與此同時背景會相應提高，甚至將檢測信號淹沒在背景信號中。對于使用過的抗體，保存在奶粉溶液或BSA溶液中，很容易造成抗體的失活，并極易染菌變質。

產品介紹

Western低背景封閉及抗體增敏稀釋液使用說明書（初次使用本產品請仔細閱讀本說明書）
在western實驗中，提高一抗和二抗的濃度，可有效的提高檢測的靈敏度，并降低抗體孵育時間。而與此同時背景會相應提高，甚至將檢測信號淹沒在背景信號中。對于使用過的抗體，保存在奶粉溶液或BSA溶液中，很容易造成抗體的失活，并極易染菌變質。培清科技開發的本產品，可有效實現western的快速，低背景封閉，并可有效提升抗原抗體反應速度，提高western靈敏度。您在不改變原有操作和試驗系統的前提下，通過本產品可提高數十倍靈敏度（親和力低的抗體提高的倍數更高）。本產品成分不影響磷酸化，乙?；贵w檢測，不影響過氧化物酶和堿性磷酸酶活性，適合熒光，發光，顯色等檢測。另外本產品允許室溫存放和操作，不含有有毒物質如疊氮納，硫柳汞鈉。本產品可單獨使用，也可配合培清科技的另一個產品膜處理液，western靈敏度將進一步提升。使用膜處理液后，需用漂洗液或去離子水漂洗3次，每次5分鐘。然后再進行封閉。包裝規格： 100ml 一瓶（室溫避光保存，保存期1年，如產生微弱沉淀，不影響使用）操作說明：本產品的操作及抗體孵育與傳統的奶粉溶液和BSA溶液一致，但封閉時間推薦10min-20min（可以但無需更長時間封閉）, 封閉后可直接加入抗體進行后續試驗。參考信息：根據培清科技實驗發現，在不影響背景的情況下，抗體濃度每提高一倍，檢測靈敏度提高一倍，抗原抗體(包括一抗二抗)的固液兩相反應在4℃真正達到反應平衡需要48h,但在前4個小時里基本可實現70%的結合量，所以即使再加大孵育時間10倍其靈敏度提升也非常有限度。在抗體濃度和孵育時間基本確定的情況下，要想繼續大幅度提高檢測靈敏度，就需要依賴二抗HRP的活性，及發光底物的靈敏性，培清科技開發了應該是目前市面上最靈敏的HRP發光液，其靈敏度超出thermo最好質量發光液的4倍，millipore的16倍，比pierce普通級發光液高出250倍（客戶可簡單將二抗倍比稀釋后點在NC膜上進行曝光檢測），所以在同樣條件下，如果用pierce的普通發光液可以檢測10pg抗原，那么利用培清科技的超敏發光液則可檢出0.04pg抗原。另外，還有兩個因素影響抗體靈敏性，一是抗原抗體的可結合性，這不僅取決于抗體的濃度和親和力，還取決于膜上抗原的狀態，培清科技開發的膜處理液及本封閉液（尤其是前者）可有效降低抗原表面自由能，使得抗原抗體更容易誘導契合。另一個影響因素就是背景，尤其是在使用高靈敏發光底物時，背景問題尤為突出，培清科技發現，微弱背景可大幅提升靈敏度，而過高背景則使正常信號淹沒于背景之中。培清科技的此低背景封閉液可使WB獲得高信噪比。
效果展示：

上下兩圖為相同的含GST融合蛋白的大腸桿菌裂解物,5倍倍比稀釋的western結果。上圖用傳統的5%奶粉溶液進行的western封閉和抗體稀釋，下圖用本試劑操作，反應條件完全一樣，如一起洗滌，同時孵育，一起曝光等。

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